第一章 色谱法概论第一节 色谱法生长简史色谱法(chromatography)又称为层析法、色层分散法。早在1906年，俄国植物学家M. Tswett在研究植物叶绿素时发现差别的色素可被CaCO3吸附，并在用石油醚洗脱时获得分散，这是最原始的液-固色谱法。但在今后的30年中，Tswett的方法并未获得人们的注意，直到1931年R. Kuhn等人用此种方法将叶黄素乐成得分散为黄体素和玉米黄质素两种身分，色谱法才受到人们的重视。

以后，许多人对Tswett的方法举行了一系列的基础研究事情，并对吸附剂、操作装置和方法举行了大量革新。在很短的时间里，色谱法在有机化学、无机化学、生物化学等领域获得了广泛的应用，2020执业药师视频学习课程下载2020视频学习课程下载 关注民众号：vvkuaiji，即可获取全科视频！1941年A.J.P. Martin和R.L.M. Synge使用含有一定量水的硅胶作为牢固相，以氯仿作为流动相对氨基酸混淆物举行了乐成的分散。由于此种分散方法的原理与Tswett的方法完全差别，Martin将此种分散方法称为分配色谱法。同时，Martin与Synge提出了液-液分配色谱的塔板理论，为色谱法奠基了坚实的理论基础。

现在塔板理论已被广泛用于阐明气相色谱、离子交流色谱和高效液相色谱等色谱方法的分散机理。1944年，Martin与其同事R. Consden、A.H. Gordon等用滤纸取代硅胶，乐成得分散了差别的氨基酸。这种方法被称为纸色谱（纸层析），并在氨基酸、糖类、肽类、抗生素的分立中具有重要作用。

1947年Boyd等人宣布了一系列应用离子交流色谱分散裂变产物和稀土元素混淆物的论文，引起了人们的极大关注。由于许多化学家和生物化学家的多年努力，现在离子交流色谱法已经成为分析、分散种种无机离子和有机离子以及卵白质、核酸、多糖之类的生物大分子的极其重要的手段。

1949年，Maclean和Hall将淀粉粘合剂引入氧化铝吸附剂中，促成薄层色谱法（TLC, thin-layer chromatography）的泛起。50年月初期，Cremer、James和Martin开始使用溶质在气相和液相之间的分配来分散物质，称为气相色谱法，并很快在石油、化学、化工、有机合成、医药食品等工业生产和科研中获得了广泛的应用。现在已逐渐形成一个专门的学科领域—气相色谱学。

到了60年月后半期，在气相色谱的启发下，人们用增加压力以提高流速，降低装填物粒度和革新支持物和牢固液的性质以提高分辨率的措施，使得经典的液相色谱向着快速、高效的偏向生长，泛起了高效液相色谱（又称高压液相色谱）（HPLC, high performance liquid chromatography； high pressure liquid chromatography）。现在高效液相色谱在分散速度和分散效率上可以和气相色谱媲美，而且种种型号的高效液相色谱仪相继推出，这使得液相色谱成为应用规模更广泛的分析、分散工具。

现在，为相识决科学研究和生产中的种种分析、分散问题，色谱法和其他技术的应用愈来愈普遍。例如：气相色谱和质谱联用，气相色谱和红外光谱联用，液相与紫外，液相与质谱，色谱法和电泳技术联用等。第二节 色谱法中的一些术语在Tswett的实验中，装柱所用的碳酸钙是一种吸附剂，色谱法中称为牢固相；把大分散的样品加到柱上的操作称为加样或者上样；用合适的溶剂冲洗柱子，使样品分散的操作称为洗脱；洗脱用的溶剂称为洗脱剂；以洗脱液的体积为横坐标，组分的浓度为纵坐标左图，该图形称为洗脱曲线或色谱图。

色谱法的经典界说是溶质在流动相和牢固相之间举行分配来到达分散的方法。对于优先在流动相分配的物质比优先在牢固相分配的移动得快些。第三节 色谱法的分类一、凭据分散的原理差别举行分类1、吸附色谱用吸附剂为牢固相的色谱称为吸附色谱。

2、分配色谱凭据两相同时存在的系统中，差别物质的分配系数差别而设计的色谱方法。3、离子交流色谱它的牢固相是离子交流剂，离子交流剂上有许多可以解离的基团。离子交流剂上可解离基团解离后，留在母体上为阳离子者为阴离子交流剂，反之为阳离子交流剂。

阴阳离子交流剂划分可以和溶液中的阴阳离子发生离子交流。由于差别的离子在离子交流剂上的交流能力差别，当举行洗脱时，各自迁移的速度也不相同，从而获得分散。

4、凝胶过滤色谱（分子筛色谱、排阻层析）使用具有一定巨细孔径的凝胶颗粒为支持物的色谱方法。这是一种凭据分子巨细举行分散的色谱方法。

5、亲和色谱凭据生物大分子与其配体（酶与其抑制剂、抗体与抗原、激素与其受体）通过次级键特异联合，而在一定条件下可以解离的特点，将与分散的生物大分子的配体通过化学反映偶联到某种载体上，便可以专一性得吸附该生物大分子，一步便可以将要分散的物质纯化得较纯。6、共价色谱使用卵白质分子外貌游离的巯基与介质共价联合。二、凭据流动相的差别举行分类1、气相色谱法（GC）流动相为气体的称为气相色谱。

凭据牢固相的差别又分为气-固色谱法（GSC）和气-液色谱法（GLC）。2、液相色谱法凡流动相为液体的皆为液相色谱。凭据牢固相的差别又进一步分为液-液色谱法（LLC）和液-固色谱法（LSC）。3、临界状态色谱法（CSC，critical-state chromatography）流动相是临界状态液体（气体）。

并又进一步分为临界状态固体色谱法（CSSC）和临界状态液体色谱法（CSLC）。三、凭据支持物的。

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